直接化学发光与酶促化学发光比较(4)
发布时间: 2018-03-21
使用此系统的有美国DPC公司的Immulite System和Beckman Coulter公司Automated Immunoassay System等,迈瑞的化学发光所使用的底物基本上属于AMPPD。
2、从固相载体上,一般分为板式分离和磁珠分离
2.1 板式分离技术:
将抗原/抗体包被在微孔板上,反应时,待检物质通过抗原抗体反应结合于包被板上,通过洗涤液数次洗涤,实现结合部分和未结合部分的分离,后加入底物、启动试剂,用光电倍增管检测发出的光信号。
此分离技术和酶联免疫分析技术(ELISA)一致,只是将最后的显色剂改为发光剂得以实现,多数手工法检测,及部分半自动仪器使用这种分离技术,由于抗原抗体结合在反应孔中,反应面积有限,所以为达到充分反应,孵育时间一般比较长。常为0.5h~2h。
手工法化学发光最常用的发光体系是鲁米诺/H2O2/增强剂,规格和ELISA基本一致,为48T/96T。
2.2 磁珠分离技术
超顺磁珠是一种表面带有特定活性基团、大小均匀、 球形、具有超顺磁性及保护壳的微粒。超顺磁珠在有外磁场存在时表现出磁力而发生聚集,无磁场时又失去磁力而分散开来。
通过一定的方法可将抗原/抗体等活性物质和磁珠表面的活性基团结合而包被于磁珠上面,检测时,将待检物和包被有抗原/抗体的磁珠在一定条件下孵育,通过抗原抗体反应结合,后通过增加外部磁场,磁珠产生磁性而聚集在一起,即可进行洗涤,实现结合部分和未结合部分的分离,最后加入底物、启动试剂,用光电倍增管检测发出的光信号。