直接化学发光与酶促化学发光比较(3)

发布时间： 2018-03-21

现通常采用的体系是Luminol/H2O2/HRP体系，即用HRP标记抗原或抗体，以鲁米诺或异鲁米诺及其衍生物作发光底物，对碘苯酚或对苯基酚等作增强剂，用NaOH+H2O2作发光启动试剂，化学发光反应2min后，光反射强度达到最高峰；20min后，光强度减少20%。

1.2.2.    异鲁米诺（ABEI）

新产业的化学发光使用的发光剂，使用的是闪光非酶激活技术，加入启动液后测试0.1-3s时间内的发光强度。

1.2.3．   AMPPD (AP)

激活酶为碱性磷酸酶（AP）

AMPPD的特性：

(1) 在碱性环境下，AMPPD的非酶解性的水解程度低，即本底低；

(2) 热稳定性好，在pH=7.0的水中，30℃时的分解半衰期为142h；

(3) 发光为辉光型，波长为470nm，在15min时强度达到高峰，15-60min内光信号强度维持一致，变化很小，即使在12h后仍能测定得出正确结果；

(4) 加入增强剂如聚氯苄乙烯苄基二甲基铵(BDMQ)或BSA等，能明显增强AP酶解AMPPD的发光强度，增强因素达100-100000倍。

现通常采用的体系是Dioxetane/AP/Enhance System，即用碱性磷酸酶(AP)标记抗原或抗体，用(金钢烷)-1，2-二氧乙烷或其衍生物作发光底物，在发光底物中加入增强剂。