直接化学发光与酶促化学发光比较(2)

发布时间： 2018-03-21

特点：

①发光反应中在形成电子激发态中间体之前，联结于吖啶环上的不发光的取代基部分从吖啶环上脱离开来，即未发光部分与发光部分分离，因而其发光效率基本不受取代基结构的影响。

②吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物化学发光不需要催化剂，在有H2O2 的稀碱性溶液中即能发光。因此应用于化学发光检测具有许多优越性。

优点主要有：

①背景发光低，信噪比高；

②发光反应干扰因素少；

③光释放快速集中、发光效率高、发光强度大；

④易于与蛋白质联结且联结后光子产率不减少；

⑤标记物稳定（在2-8 ℃下可保存数月之久）。

1.1.2.三联吡啶钌

三联吡啶钌 [RU(bpy)3]2+是电化学发光剂，它和电子供体三丙胺（TPA）在阳电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。

1.2 酶促反应化学发光

是利用标记酶的催化作用，使发光剂（底物）发光，这一类需酶催化后发光的发光剂 称为酶促反应发光剂。酶促化学发光灵敏度高，但速度慢，酶活性容易受外界影响，其代表性的发光物质有鲁米诺及其衍生物、AMPPD

1.2.1.    鲁米诺及其衍生物（HRP)

激活酶为辣根过氧化物酶（HRP)，鲁米诺体系的发光基本上为闪光型且信号弱。但在使用增强剂的情况下，发光的持续时间可延到30-60min，发光强度至少增加100倍以上。