pvdf膜使用前为什么要用甲醇浸泡(11)

发布时间：2018-01-31

（3）也可在恒流状态下以200mA转移2h。

（4）若转移中因凝胶变形发生条带扭曲或由于凝胶中电解质渗出导致过热，可预先将凝胶在转移缓冲液中浸泡。

（5）使用预先染色的蛋白质分子量标准品或转移后将凝胶染色，可检查转移是否彻底。

（6）对于较大蛋白质，较低的丙烯酰胺浓度可获得较好的转移效果。

（7）对电转移来说，最常遇到的问题是目的蛋白质转移效率低，转移效率可由转移后对凝胶或膜染色来进行观察。

六、检测

1、实验器材

（1）器材：摇床，避光盒，洗膜用平皿，X线片，X线片曝光盒等。

（2）试剂：

① 10×TBST缓冲液：100 mmol/L Tris· (pH 8.0)， HCl 1500mmol/L NaCl，0.2% Tween-20，补水至1000ml，高压灭菌，4℃保存，使用前稀释10倍。

② 5%脱脂奶粉（1×TBST配制）。

③ 一抗：羊抗Actin (使用前用1×TBST稀释200倍)。

④二抗：兔抗羊Ig G/HRP (使用前用1×TBST稀释2000倍)。

⑤ECL试剂盒。