egfp标签蛋白大小(2)

发布时间：2017-03-01

gst标签蛋白多少kd。

　　如果要去除GST融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。

　　检测：可用GST抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。

　　二.His6标签

　　His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。

　　使用His-tag有以下几个优点：

　　1.标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；

　　2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；

　　3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；

　　4.His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体；

　　5.可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；

　　6.可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。